A bacterioscopia com a coloração de Gram é um método  de triagem, ou até mesmo confirmatório em alguns  casos,  constituindo-se uma peça importante e fundamental.  Sua técnica é simples, rápida e tem capacidade  de resolução. Além disso, os custos com investimento e  manutenção são consideravelmente baixos diante da eficácia  alcançada com os resultados imediatos dos testes.  Esse método baseia-se na composição da parede celular,  sendo que
						
						-                              A.                                                  havendo questionamento sobre a Gram positividade  ou Gram negatividade da cultura, deve ser feita uma  coloração controle paralela, com uso de culturas  bacterianas conhecidas como Gram positivas, como,  por exemplo, a Escheruchia coloI, e Gram negativas,  como o Staphylococcus aureus.
-                              B.                                                  nas bactérias Gram negativas, o tratamento com  álcool-acetona não é capaz de remover o corante  inicialmente aplicado à cultura devido à espessa  camada  de peptideoglicanas na parede celular.
-                              C.                                                  após a primeira coloração, as bactérias Gram positivas  formam um complexo azul intenso que não é  removido pelo álcool-acetona, pois a parede celular  é formada por lipoproteínas, fosfolipídeos, proteínas  e polissacarídeos que impedem a retirada do complexo  cristal violeta-iodo.
-                              D.                                                  o descoloramento para mais ou para menos da  cultura é resultante da incorreta diferenciação pelo  álcool-acetona, caracterizando as Gram positivas  com coloração rosa ou vermelha e as Gram negativas,  roxas.
-                              E.                                                  as bactérias Gram negativas possuem uma fina  camada de peptideoglicanas sob uma camada de  lipoproteínas, fosfolipídeos, proteínas e lipopolissacarídeos,  que tem seus lipídeos removidos pelo  tratamento álcool-acetona, aumentando a permeabilidade  e permitindo a descoloração para posterior  revelação.