Questões de Biologia da Universidade Federal do Rio de Janeiro (UFRJ)

Os fluídos biológicos têm pH característicos. O sangue, por exemplo, apresenta pH em torno de 7,4. A concentração molar de H+ neste fluído biológico é:

• A. 10^-7,4 M.
• B. -10^7,4 M.
• C. 10^7,4 M.
• D. 74 M.
• E. 7,4 M.

Em relação à técnica de eletroforese em gel de poliacrilamida com dodecil-sulfato de sódio (SDS), é correto afirmar que:

• A. o 2-mercaptoetanol desfaz pontes de hidrogênio entre as cadeias laterais dos resíduos de aminoácidos e a água.
• B. o SDS é um detergente aniônico que se liga às proteínas conferindo carga global negativa.
• C. a estrutura terciária das proteínas tem uma forte influência na separação.
• D. as proteínas são separadas pelas suas cargas globais.
• E. as proteínas com menor volume molecular são retidas mais fortemente na matriz de poliacrilamida.

Em relação ao metabolismo celular, é correto afirmar que:

• A. As rotas catabólicas consomem mais energia na forma de ATP do que as rotas anabólicas.
• B. O ATP é o intermediário químico produzido na síntese de macromoléculas.
• C. O catabolismo compreende algumas rotas de degradação de nutrientes orgânicos em produtos finais simples para poder extrair energia química e convertê-la em formas úteis às células.
• D. Todas as enzimas são proteínas que catalisam as reações do metabolismo.
• E. O anabolismo compreende as rotas metabólicas que iniciam com macromoléculas e convertem-nas gradativamente em moléculas menores, menos complexas.

Em relação à técnica de focalização isoelétrica, é correto afirmar que:

• A. as estruturas terciárias das proteínas não afetam na migração.
• B. as proteínas carregadas positivamente migram para o ânodo.
• C. o ponto isoelétrico é o pH em que a carga global das proteínas é positiva.
• D. o dodecil-sulfato de sódio (SDS) é usado para desnaturação das proteínas em um passo anterior à focalização isoelétrica.
• E. as proteínas migram de acordo com sua carga global até atingirem o ponto isoelétrico.

A técnica utilizada na separação e purificação de proteínas é:

• A. Espectrofotometria.
• B. Ressonância Nuclear Magnética.
• C. Difração por Raio-X.
• D. Eletroforese.
• E. Western-Blot.

Sobre a análise da eritropoietina e análogos em urina, por focalização isoelétrica, é correto afirmar que ela consiste:

• A. numa purificação por cromatografia de afinidade, focalização isoelétrica, Western-Blot e revelação colorimétrica.
• B. numa cromatofocalização, dupla imunotransferência e revelação colorimétrica.
• C. nas etapas de pré-concentração da amostra, focalização isoelétrica, dupla imunotransferência e quimioluminescência.
• D. em uma focalização isoelétrica, onde diferentes eritropoietinas são separadas por volume molecular, Western-Blot e quimioluminescência.
• E. numa ultrafiltração, focalização isoelétrica, Western-Blot e revelação colorimétrica.

A eritropoietina (EPO) é um hormônio, cuja função principal é regular a produção de eritrócitos. Em relação a este hormônio, podemos afirmar que:

• A. eritropoietina é uma proteína ligada a lipídeo (lipoproteína).
• B. eritropoietina é um hormônio produzido principalmente pelo fígado, que promove a formação de eritrócitos no sangue.
• C. as células que sintetizam a eritropoietina são sensíveis aos baixos níveis de oxigênio no sangue.
• D. as formas recombinantes de eritropoietina têm peso molecular idêntico à endógena.
• E. cerca de 10% da eritropoietina endógena é produzida pelo rim.

Métodos de imunopurificação são comumente usados como técnicas de separação e purificação de proteínas. Sobre eles, é correto afirmar que:

• A. não dependem da especificidade do ligante.
• B. baseiam-se na afinidade da proteína com um ligante específico.
• C. a ligação entre a proteína e o ligante deve ser irreversível.
• D. são usados na purificação da eritropoietina (EPO) em urina, apesar da baixa recuperação de proteínas da EPO e da inespecificidade de suas diferentes isoformas.
• E. a carga e forma da proteína a ser isolada não interferem na imunopurificação.

A técnica de “Western-Blot” é caracterizada pela transferência de proteínas para a superfície de uma membrana. Identifique o item a seguir que melhor representa essa técnica.

• A. No caso da eritropoietina e análogos farmacológicos, a dupla transferência aumenta a especificidade da técnica.
• B. O passo de incubação com o anticorpo secundário é necessário para o reconhecimento da proteína de interesse.
• C. O sinal detectado pelo complexo proteína-anticorpo primário é indiretamente proporcional à quantidade de proteína na amostra.
• D. A técnica permite a purificação de proteínas de amostras complexas.
• E. O passo de bloqueio da membrana é extremamente útil e aumenta as interações inespecíficas.

Uma amostra que contém quatro proteínas (pontos isoelétricos das proteínas são: A = 9.2; B = 6.4; C = 7.0; D = 5.4) diluídas em um tampão com pH 6,4 será submetida a campo elétrico. Sobre o comportamento migratório dessas proteínas, é correto afirmar que:

• A. A e C migrarão para o polo positivo, B não migrará e D migrará para o polo negativo.
• B. A e B migrarão para o polo negativo, e C e D, para o polo positivo.
• C. A e B migrarão para o polo positivo e C e D migrarão para o polo negativo.
• D. A e C migrarão para o polo negativo, B não migrará e D migrará para o polo positivo.
• E. Todas as proteínas migrarão para o polo positivo, pois no pH de 6,4 elas terão carga global negativa.